50UL High If المكثف افتخ488 تيراميد ستاين

نموذج رقم.
G1231-50UL
عادة تسمية
الطب الكيميائي
تطبيق
صناعة, البحث العلمي
عقارات
الكاشف الكيميائي الحيوي
حزمة النقل
Carton
تخصيص
50UL
العلامة التجارية
Servicebio
الأصل
China
السعر المرجعي
$ 30,780.00 - 35,100.00

وصف المنتجات

50ul مرتفع إذا كانت الشدة iF488 تيراميد ستاين

محتويات الحزمة:
 رقم عنصر المنتج اسم المنتج المواصفات
iF488-Tyramide G1231 -50مايكرولتر 50 ميكرو لتر


مقدمة عن المنتج:

هذا المنتج، iF488-Tyramide، هو التيراميد الذي يحمل علامة الأصباغ الفلورسنت iF488. بالمقارنة مع منتج آخر من شركتنا، FITC-Tyramide (G1222)، يتمتع هذا المنتج باستقرار أفضل وكثافة أفضل للفلورة، ويمكن استخدامه كترقية المنتجات البديلة   إلى FITC-Tyramide، المستخدمة في تقنية تضخيم إشارة التيراميد (TSA، تضخيم إشارة التيراميد)، المشار إليها فيما يلي باسم تقنية TSA. المبدأ الرئيسي لتكنولوجيا TSA : في وجود perxide H2O2 للهيدروجين ، يمكن للأكسدة الفجل (hradish oxidase) أن يحفز التيرامين إلى وسيط نشط جدا قصير الأجل. في وقت قصير، يمكن ربط الوسيط بشكل تساهمي إلى مجمعات البروتين تيرامين المحيطة يتم تشكيلها على سطح غني بالإلكترون، والتي يتم إثرائها في عدد كبير من الخلائط التي تركز على الإنزيم "الجزيرة" مثل الخلائط.
وبسبب صبغ الفلورسنت iF488 المسمى بالتيرامين، فإن كمية كبيرة من ترسيب الفلوريسيين تتكون في الموقع الملزم للمضادات - الأجسام المضادة للحصول على تضخيم الإشارة. بالإضافة إلى ذلك، يمكن تكرار المناعية المتعددة مرات، باستخدام التيفرات الفلورسنت المختلفة لتحقيق تلطيخ متعدد الفلورسنت.

وفيما يلي بيانات طيف التلوير لمنتجات السلسلة:
رقم العنصر اسم المنتج المواصفات مثال/م
G1222-50مايكرولتر FITC-Tyramide 50 ميكرو لتر 492/518
G1223-50مايكرولتر CY3-Tyramide 50 ميكرو لتر 555/569
G1231-50مايكرولتر iF488-Tyramide 50 ميكرو لتر 491/516
G1233-50مايكرولتر iF555-Tyramide 50 ميكرو لتر 557/570
G1232-50مايكرولتر iF647-Tyramide 50 ميكرو لتر 656/670

ظروف التخزين:
خدمة نقل حزم الثلج ، تخزينها في درجة حرارة -20 درجة مئوية ، فترة الصلاحية  هي 12 شهرًا.

التعليمات

على سبيل المثال، إذا أخذت شرائح الأنسجة، فإن الماء في الخطوات التجريبية التالية هو ماء نقي، وتشير المواد الكيميائية التي تم إنتاجها إلى منتجات ServiceBio ذات الصلة:

1) اقسام الانسجة المبلل بالماء;

2) استرجاع المستضد: وفقاً للمادة المضادة الأساسية المستخدمة ونوع العينة، استخدم طريقة مناسبة لإجراء استرجاع المستضد على قسم الأنسجة. 1×PBS (يوصى باستخدام G4202 أو G0002) اغسل 3 مرات، 5 دقائق في كل مرة؛

3) استخدام   قلم ap  لوضع دائرة على النسيج ووضع علامة عليه؛

4) (اختياري) إضافة مغير تقادم أنسجة (محلول G1221A الموصى به) إلى النسيج، وحاضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 30 دقيقة، ثم اغسل لمدة 5 دقائق؛

5) عدم تنشيط بيروكسيداز داخلي: أضف 3% من H2O2 إلى القسم لتغطية الأنسجة، وحاضن في الظلام في درجة حرارة الغرفة لمدة 25 دقيقة  ، لمنع بيروكسيداز داخلي لتقليل ترك بقع خلفية غير محددة. اغسل 3 مرات مع 1×PBS، 5 دقائق في كل مرة؛

6.الكتلة: بعد جفاف الشرائح قليلاً، تتم إضافة 3% من BSA أو المصل من خلال استخدام فراغات في الإغلاق لمدة 30 دقيقة. إذا كان الجسم المضاد الأساسي من أصل الماعز، فقم بلصّ الجسم باستخدام مصل حمار بنسبة 10%، ثم قم بلصّ الجسم بنسبة 3% من BSA للمصادر الأخرى؛

7) وضع الجسم المضاد الأولي: خفف الجسم المضاد الأولي إلى تركيز مناسب مع 1 × PBS أو محلول سد (يوصى باستخدام G2010). قم برجها برفق من محلول الانسداد الموجود في القسم، وأضف مضاد الجسم المخفف الأساسي بالقطع لتغطية النسيج، وضع القسم بشكل مسطح في صندوق حجرة رطب   به ماء، ثم ضع الحاضنة طوال الليل في درجة حرارة 4 درجات مئوية اغسل 3 مرات مع 1×PBS، 5 دقائق في كل مرة؛

8) وضع الجسم المضاد الثانوي المسمى HRP: خفف الجسم المضاد الثانوي إلى تركيز مناسب مع 1×PBS أو محلول سدّ (يوصى باستخدام G2010)، وأضف مضاد الجسم الثانوي فراس إلى النسيج، وحاضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 50 دقيقة. اغسل 3 مرات مع 1×PBS، 5 دقائق في كل مرة؛

9) خفف   iF488-Tyramide1:500 مع TBST (أضف H2O2 إلى التركيز النهائي 0.03، w/v قبل الاستخدام) لإعداد TSA تلطيخ حل العمل. أضف 100 مايكرولتر من محلول العمل المتسلسل لكل عينة، وقم بالحضانة لمدة 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة في الظلام. اغسل الملابس بمعدل 1×PBS 3 مرات، و5 دقائق في كل مرة؛ (ملاحظة: يوصى بتحضير محلول عمل بقع TSA للاستخدام الحالي، ويجب تخزينه عند 4 درجات مئوية ومحميه من الضوء. يعمل خلال 24 ساعة)

10) العلاج بالموجات الدقيقة: يوضع قسم الأنسجة في صندوق إصلاح مليء بمحلول استرجاع المستضد (اختر حل استرجاع المستضد المناسب وفقا لنوع النسيج والجسم المضاد) لعلاج تسخين الميكروويف لإزالة الأجسام المضادة الأساسية والثانوية الملتصمة. في هذه الخطوة، من الضروري منع حدوث رقائق جافة بسبب التبخر السائل المفرط.

(ملاحظة: إذا كنت بحاجة إلى تنفيذ بقع فلورسنت مزدوجة أو متعددة، فتابع وفقًا لهذه الخطوة. إذا لم تكن بحاجة إلى تنفيذ تسلسل مزدوج أو متعدد من ألوان الفلورسنت، فقم بتخطي هذه الخطوة وتابع إلى الخطوة 12)

11) كرر الخطوات من 7 إلى 10، وضع ثاني جسم مضاد أولي، جسم مضاد ثانوي، وملصق TSA، وعلاج بالموجات الدقيقة لإزالة الجسم المضاد الأساسي والجسم المضاد الثانوي.

12. تلطيخ Nucleus بـ DAPI: بعد تجفيف الأقسام قليلاً، أضف محلول تلطيخ DAPI (يوصى بـ G1012) إلى النسيج، وقم بحضانة الأنسجة لمدة 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة في الظلام. اغسل 3 مرات مع 1×PBS، 5 دقائق في كل مرة.

13) (اختياري) تقشير الأنسجة تلقائياً: إضافة خالط التلوير التلقائي (يوصى باستخدام محلول G1221B) بقطعها إلى الأنسجة، وحاضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 5 دقائق، واشطفها بالماء الجاري لمدة 3 دقائق.
 
  1. التركيب والفحص المجهري: بعد تجفيف الأقسام قليلاً، أضف أقراص تثبيت مقاومة للفلورة (يوصى باستخدام G1401). حدد قناة الفلورة المناسبة لملاحظة الصور وتجميعها. يمكن تخزين الشرائح لمدة 15 يومًا في حرارة تبلغ 4 درجات مئوية في صندوق شرائح غير مضيء.

الاحتياطات

1. بعد ذوبان المنتج في درجة حرارة الغرفة، استخدم جهاز طرد مركزي لإجراء عملية طرد مركزي قصيرة، واستخدم طرف شفط نظيف بعد النفخ والخلط.

2. بالمقارنة مع الجسم المضاد الثانوي الفلورسنت، تتمتع مجموعة أدوات إدارة سلامة النقل بحساسية أعلى وإشارة أقوى. ولذلك، فإن تركيز الجسم المضاد الأولي يحتاج إلى خفض، بشكل عام بمقدار 5 إلى 10 مرات على أساس نسبة التخفيف الموصى بها في دليل الجسم المضاد، لتقليل الفلوز في الخلفية الناجم عن ربط غير محدد. يوصى بتعيين التركيز المتدرجة للجسم المضاد الأساسي للحصول على أفضل تأثير.

3) إذا كان فلورة الخلفية قوياً، فمن المستحسن إضافة خطوة لزج التلوين التلقائي للأنسجة.

4) نسبة التخفيف الموصى بها لتيراميد الفلورسنت هي 1:500، ويمكن تعديل نسبة التخفيف وفقاً للنتائج التجريبية (نطاق نسبة التخفيف الموصى به هو 1:200-1:1000).

5) بالنسبة للملصقات الفلورسنت المتعددة، يوصى بوضع الجسم المضاد المتعدد الأضلاع أولاً، ثم وضع الجسم المضاد أحادي النسيلة في حضانة الجسم المضاد المناظر للبروتين المستهدف المنخفض الوفرة أولاً، ثم وضع الجسم المضاد المقابل للبروتين المستهدف في حضانة الجسم المضاد المناظر للوفرة العالية.

6. يرجى ارتداء معطف المختبر والقفازات التي تستعمل لمرة واحدة أثناء التشغيل.
50UL High If Intensity If488 Tyramide Stain 50UL High If Intensity If488 Tyramide Stain 50UL High If Intensity If488 Tyramide Stain 50UL High If Intensity If488 Tyramide Stain 50UL High If Intensity If488 Tyramide Stain
 

 

الكاشف الكيميائي

TREF.COM.MK, 2023